第361题 关于质粒的叙述，下列哪项错误

A.大小约为数千个碱基对

B.是双链的线性分子

C.存在于大多数细菌的胞质中

D.易从一个细菌转移入另一个细菌

E.常带抗药基因

参考答案：B

解析：

①细菌质粒是存在于细胞质中的一类独立于染色体的自主复制的遗传成分。绝大多数的质粒都是由环形双链DNA组成的复制子，而不是双链的线性分子。故B是错的。②质粒DNA仅占细胞染色体组的10%一3%，但却编码着一些重要的非染色体控制的遗传性状。其中对抗生素的抗性是质粒的最重要的编码特性之一。③革兰阴性细菌的质粒可以分成接合型和非接合型的两种类群：接合型的质粒，又称为自我转移的质粒。非接合型的质粒，亦称为不能自我转移的质粒。④根据寄主细胞所含的拷贝数的多少，可将质粒分成两种不同的复制型：一种是低拷贝数的质粒，每个寄主细胞中仅含有1~3份的拷贝，称这类质粒为“严紧型”复制控制的质粒；另一类是高拷贝数的质粒，每个寄主细胞中可高达10—60份拷贝，这类质粒被称为“松弛型”复制控制的质粒。⑤质粒的不亲和性，有时也称为不相容性，是指在没有选择压力的情况下，两种亲缘关系密切的不同质粒，不能够在同一个寄主细胞系中稳定地共存的现象。在细胞的增生过程中，其中必有一种会被逐渐地排斥（稀释）掉。这样的两种质粒称为不亲和质粒。

第362题 关于重组DNA技术的叙述，错误的是

A.质粒、噬菌体可作为载体

B.限制性内切酶是主要工具酶之一

C.重组DNA由载体DNA和目标DNA组成

D.重组DNA分子经转化或转染可进入宿主细胞

E.进入细胞内的重组DNA均可表达目标蛋白

参考答案：E

解析：

克隆载体一般是原核细菌将需要克隆的基因与克隆载体的质粒相连接，再导入原核细菌内，质粒会在原核细菌内大量复制，形成大量的基因克隆，被克隆的基因不一定会表达，但一定被大量复制。而表达载体是一些用于工程生产的细菌，他们被导入目标基因，这些目标基因会在此类细菌中得到表达，生产出我们需要的产物，导入的基因是由克隆载体产出的。是否含有表达系统元件，即启动子核糖体结合位点克隆位点转录终止信号，这是用来区别克隆载体和表达载体的标志。因此，进入细胞内的重组DNA不一定都表达蛋白质。

第363题 实验室内常用的连接外源性DNA载体的酶是

A.Taq酶

B.T4DNA连接酶

C.DNA聚合酶I

D.DNA聚合酶Ⅱ

E.DNA聚合酶Ⅲ

参考答案：B

解析：

常用的DNA连接酶有两种：来自大肠杆菌的DNA连接酶和来自噬菌体的T4DNA连接酶。二者的作用机制类似。分子生物学试验中主要采用T4DNA连接酶，因该酶在正常条件下，即能完成连接反应。T4DNA连接酶是一单链多肽，分子量为68，000Da，它能催化双链DNA上相邻的3’羟基和5’磷酸末端形成磷酸二酯键。

第364题

KlenowDNA聚合酶是

A.A

B.B

C.C

D.D

E.E

参考答案：C

解析：

coli DNA聚合酶I经胰蛋白酶或枯草杆菌蛋白酶部分水解生成的C末端605个氨基残基片段，即Klenow片段，又名DNA聚合酶I大片段，该片段保留了DNA聚合酶I的5’-3’聚合酶和3’-5'外切酶活性，但缺少完整酶的5’-3’外切酶活性。DNA聚合酶I断开后的存在另一个323个氨基酸残基片段，保留5'-3’外切酶活性。故选C。

第365题

TaqDNA聚合酶是

A.A

B.B

C.C

D.D

E.E

参考答案：E

解析：

Taq DNA聚合酶是从一种水生栖热菌yTl株分离提取的，yT是一种嗜热真细菌，能在70~75℃生长。Taq DNA聚合酶虽然在90℃以上几乎无DNA合成，但确有良好的热稳定性，在PCR循环的高温条件下仍能保持较高的活性。在 92.5℃、95℃、97.5℃时，PCR混合物中的TaqDNA聚合酶分别经130min，40min和5~ 6min后，仍可保持50%的活性，Taq DNA聚合酶的热稳定性是该酶用于PCR反应的前提条件，也是PCR反应能迅速发展和广泛应用的原因。故选E。

第366题

用来鉴定蛋白质的技术是

A.A

B.B

C.C

D.D

E.E

参考答案：D

解析：

RNA印迹技术正好与DNA相对应，故被称为Northern印迹杂交，与此原理相似的蛋白质印迹技术则被称为Western blot。故选D。

第367题

用来鉴定RNA的技术是

A.A

B.B

C.C

D.D

E.E

参考答案：A

解析：

Northern印迹杂交(Northern blot)。这是一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。故选A。

第368题

用来鉴定DNA的技术是

A.A

B.B

C.C

D.D

E.E

参考答案：C

解析：

DNA印迹技术由Southern于1975年创建，称为Southern印迹技术，故选C。

第369题 重组DNA的连接方式不包括

A.黏性末端连接

B.平头末端连接

C.黏性末端与平头末端连接

D.DNA连接子技术

E.DNA适配子技术

参考答案：C

解析：

外源DNA片段和质粒载体的连接反应策略有以下几种：①带有非互补突出端的片段：用两种不同的限制性内切酶进行消化可以产生带有非互补的黏性末端，这也是最容易克隆的DNA片段。②带有相同的黏性末端：用相同的酶或同尾酶处理可得到这样的末端。③带有平末端：是由产生平末端的限制酶或核酸外切酶消化产生，或由DNA聚合酶补平所致。由于平端的连接效率比黏性末端要低得多，故在其连接反应中，T4 DNA连接酶的浓度和外源DNA及载体DNA浓度均要高得多。通常还需加入低浓度的聚乙二醇( PEG 8000)以促进DNA分子凝聚成聚集体的物质以提高转化效率。特殊情况下，外源DNA分子的末端与所用的载体末端无法相互匹配，则可以在线状质粒载体末端或外源DNA片段末端接上合适的连接子或适配子使其匹配，也可以有控制地使用E．coli DNA聚合酶I的klenow大片段部分填平3’凹端，使不相匹配的末端转变为互补末端或转为平末端后再进行连接。黏性末端与平末端不能直接连接。

第370题 基因重组不包括

A.转化

B.转换

C.整合

D.转导

E.转位

参考答案：B

解析：

外来基因引起细胞生物性状改变的过程叫转化。转化，一般都是指实验室内从细菌中纯化的DNA分子直接导入遗传性状相异的细菌，比如质粒转化。以噬菌体把外源基因导人细菌的过程叫转染。利用载体（噬菌体或病毒）把遗传物质从一种宿主传给另一种宿主的过程叫转导。一个或一组基因从一处转移到基因组另一处的过程叫转位，这些游动的基因叫转位子。转位子是存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。最简单的转位子不含有任何宿主基因而常被称为插入序列(IS)，它们是细菌染色体或质粒DNA的正常组成部分。

第371题

PCR变性温度一般为

A.A

B.B

C.C

D.D

E.E

参考答案：A

解析：

PCR由变性——退火——延伸三个基本反应步骤构成：模板DNA的变性：模板DNA经加热至96℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备。

第372题

PCR引物退火温度一般为

A.A

B.B

C.C

D.D

E.E

参考答案：E

解析：

模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合。故选E。

第373题

PCR引物延伸温度一般为

A.A

B.B

C.C

D.D

E.E

参考答案：C

解析：

引物的延伸为72℃。

第374题 基因工程的基本过程不包括

A.载体和目的基因的分离

B.限制性内切酶的切割

C.DNA重组体的形成及转化

D.蛋白质空间结构的测定

E.重组体的筛选与鉴定

参考答案：D

解析：

进行基因操作一般要经历四个基本过程，也就是基因操作的“四步曲”：①取得所需要的特定基因，也就是目的基因。②目的基因与运载体结合：将目的基因与运载体结合的过程，实际上是不同来源的DNA重新组合的过程。③将目的基因导入受体细胞：目的基因的片段与运载体在生物体外连接形成重组DNA分子后，下一步是将重组DNA分子引入受体细胞中进行扩增。也就是转化。④重组体的筛选和鉴定：但是，蛋白质空间结构的测定不在基因工程的基本过程中。

第375题 有关理想质粒载体的特点，正确的是

A.为线性单链DNA

B.含有多种限制酶的单一切点

C.含有同一限制酶的多个切点

D.其复制受宿主控制

E.不含耐药基因

参考答案：B

解析：

理想质粒作为载体需具备如下特点：①具有松弛型复制子（如ColEl）。②在复制子外存在几个单一的酶切位点（或多克隆位点），以便目的DNA片段插入。③具有插入失活的筛选标记，以便从平板中直接筛选阳性重组子。④分子量相对较小和较高的拷贝数。只有B符合。

第376题 限制性内切酶是一种

A.核酸特异的内切酶

B.DNA特异的内切酶

C.DNA序列特异的内切酶

D.RNA特异的内切酶

E.RNA序列特异的内切酶

参考答案：C

解析：

限制性核酸酶是一类能从DNA分子中间水解磷酸二酯键，从而切断双链DNA的核酸水解酶。它们不同于一般的脱氧核糖核酸酶，它们的切点大多很严格，要求专一的核苷酸顺序——识别顺序。是DNA序列特异的内切酶。长期以来，难以深入研究的DNA大分子，借此可以切割成特定的小片段来分析。限制性核酸酶的发现，为基因结构、DNA碱基顺序分析和基因工程的研究开辟了途径。故选C。

第377题 生长因子受体不具备下列哪项结构特点

A.是跨膜糖蛋白

B.胞外部分构成结合域

C.跨膜段由20多个疏水氨基酸组成

D.胞内部分有较多可以被磷酸化的酪氨酸残基

E.酪氨酸残基磷酸化后形成与G蛋白的结合位点

参考答案：E

解析：

生长因子受体多为催化型受体，属于单次跨膜蛋白。即：具有酶活性的受体在其胞质面有酪氨酸蛋白激酶的结构域，当配体与受体结合后，可激活酶的活性，从而使受体具有催化活性。单个跨膜α螺旋受体N端在胞外，形成胞外区，可与配体结合。中段是1个跨膜的α螺旋结构。跨膜区段一般由20个左右的疏水氨基酸组成。C端在胞内；该受体分为催化型受体和非催化型受体两大类，前者受体本身的胞内区有潜在的TPK作用，全部是糖蛋白。当与配体结合时，就表现出TPK作用，催化自身磷酸化，并磷酸化底物蛋白的特定酪氨酸残基。后者无TPK作用；但该类受体的胞内区可与有TPK作用的蛋白偶联，从而表现出TPK作用。G蛋白偶联受体(GPCRs)，是另一大类膜蛋白受体的统称。这类受体的共同点是其立体结构中都有7个跨膜α螺旋，且其肽链的C端以及连接第5和第6个跨膜螺旋的胞内环上都有G蛋白（鸟苷酸结合蛋白）的结合位点。酪氨酸残基磷酸化后并不形成与G蛋白的结合位点。

第378题 关于原癌基因的叙述，下列哪项错误

A.正常细胞无此基因

B.基因突变可激活原癌基因表达

C.正常细胞均有原癌基因

D.病毒感染可使该基因活化表达

E.多种理化因素可活化此基因表达

参考答案：A

解析：

原癌基因是细胞内与细胞增生相关的基因，是维持机体正常生命活动所必需的，在进化上高度保守。当原癌基因的结构或调控区发生变异，基因产物增多或活性增强时，使细胞过度增生，从而形成肿瘤。恶性肿瘤的发生归根到底是因为原癌基因的激活和抑癌基因的功能丧失，往往涉及多个基因的改变。原癌基因的激活方式多种多样，但概括起来无非是基因本身或其调控区发生了变异，导致基因的过表达，或产物蛋白活性增强，使细胞过度增生，形成肿瘤。正常细胞中有此基因，故选A。

第379题

获得启动子和增强子

A.A

B.B

C.C

D.D

E.E

参考答案：B

解析：

长末端重复(LTR)，LTR对病毒DNA整合进宿主细胞基因组和控制病毒RNA合成均有重要作用。同时它具有真核生物基因表达时所需的基本功能，例如，启动作用、起始作用和转录物的多聚腺嘌呤加尾作用等。LTR中还有增强子序列，可以增强病毒RNA的转录能力，或对前病毒DNA两侧的宿主DNA的转录活性起调控作用。

第380题

原癌基因扩增

A.A

B.B

C.C

D.D

E.E

参考答案：D

解析：

原癌基因扩增是指基因拷贝数的增加。在某些造血系统恶性肿瘤中，癌基因扩增是一个极常见的特征，如前髓细胞性白血病细胞系和这类病人的白血病细胞中，c-myc扩增8—32倍。