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第241题
生物素亲和素系统(BAS)放大作用的机制主要是
A.亲和素的四个生物素部位可同时结合多价性的生物素化衍生物
B.生物素、亲和素可分别与酶、放射性核素等结合形成标记物
C.经化学修饰后,生物素成为活化生物素
D.二者之间极高的亲和力
E.生物素、亲和素之间为特异性结合
参考答案:A
解析:
每个亲和素分子有四个生物素结合部位,可同时以多价形式结合生物素化的大分子衍生物和标记物。因此,BAS具有多级放大作用,使其在应用时可极大地提高检测方法的灵敏度。
第242题
关于生物素标记蛋白质的注意事项,下列说法错误的是
A.根据抗原或抗体分子结构中所带可标记基团的种类以及分子的理化性质,选择相应的活化生物素和反应条件
B.活化生物素与待标记抗原或抗体可以是任意比例
C.生物素标记酶时会影响其免疫活性
D.生物素与抗原、抗体等蛋白质结合后不影响后者的免疫活性
E.在生物素与被标记物之间加入交联臂样结构可减少空间位阻影响
参考答案:B
解析:
生物素标记蛋白质的注意事项包括:①根据抗原或抗体分子结构中所带可标记基团的种类以及分子的理化性质,选择相应的活化生物素和反应条件。②标记反应时,活化生物素与待标记抗原或抗体应有适当比例。③为了减少空间位阻影响可在生物素与被标记物之间加入交联臂样结构。④生物素与抗原、抗体等蛋白质结合后不影响后者的免疫活性;标记酶时则结果有不同。
第243题
活化生物素标记大分子蛋白质后,影响生物素活性的主要因素是
A.连接臂的6-氨基己糖基团
B.大分子蛋白质中的赖氨酸的a氨基
C.大分子蛋白的空间位阻效应
D.大分子蛋白的等电点发生改变
E.以上都不是
参考答案:C
解析:
活化生物素标记大分子蛋白质后,影响生物素活性的主要因素是大分子蛋白的空间位阻效应。空间位阻效应主要是指分子中某些原子或基团彼此接近而引起的空间阻碍和偏离正常键角而引起的分子内的张力。
第244题
亲和素和生物素结合的特点是
A.免疫反应
B.不属于免疫反应
C.亲和力小
D.特异性弱
E.不够稳定
参考答案:B
解析:
亲和素与生物素结合的特点:不属于免疫反应,但特异性强,亲和力大,两者结合后及其稳定。
第245题
每个亲和素能结合生物素分子的数目是
A.4
B.2
C.8
D.3
E.1
参考答案:A
解析:
亲和素(AV)亦称抗生物素蛋白、卵白素,是从卵白蛋白中提取的一种由4个相同亚基组成的碱性糖蛋白。每个亲和素能结合4个分子的生物素,二者之间的亲和力极强。
第246题
下列有关斑点金免疫渗滤试验双抗体夹心法的叙述中,错误的是
A.以硝酸纤维素膜为载体
B.用胶体金标记抗原
C.斑点颜色的深浅可提示阳性的强弱
D.膜中央出现红色斑点即为阳性反应
E.首先滴加纯化的抗体试剂(首先用纯化的抗体固定在硝酸纤维素膜上)
参考答案:B
解析:
斑点金免疫渗滤试验双抗体夹心法中,用胶体金标记的是抗体。
第249题
下列有关胶体金特性的叙述中,错误的是
A.胶体金颗粒稳定、均匀地分散悬浮在液体中
B.电解质可使胶体金沉淀
C.较大颗粒的胶体金是橙黄色的
D.胶体金颗粒越小,其吸收波长越短
E.蛋白质有保护胶体金稳定性的作用
参考答案:C
解析:
胶体金的呈色性为:较大颗粒的胶体金呈紫红色;中等大小的胶体金是酒红色;最小的胶金是橙黄色。故C选项说法错误。
第250题
下列关于免疫印中需要注意的问题错误的是
A.影响免疫印迹成败的一个主要因素是抗原分子中可被抗体识别的表位的性质
B.免疫印迹实验中常选用单克隆抗体
C.IBT法在临床应用中存在一定的局限性
D.有若干种方法常用于提高免疫印迹的灵敏度,一种是在电泳之前应用免疫沉淀法将抗原进行纯化和浓缩
E.本法综合了SDS-PAGE的高分辨力和ELISA法的高特异性和敏感性,是一个有效的分析手段
参考答案:B
解析:
抗体的性质影响免疫印迹成败的一个主要因素是抗原分子中可被抗体识别的表位的性质。只有那些能识别耐变性表位的抗体可与抗原结合,多数多克隆抗血清中或多或少地含有这种类型的抗体,所以在免疫印迹实验中常选用多克隆抗体。
第252题
当前免疫电镜技术中应用最广的标记物是
A.硝酸银
B.辣根过氧化物酶
C.胶体金
D.铁蛋白
E.SPA
参考答案:C
解析:
胶体金标记免疫电镜技术是利用胶体金在碱性环境中带有负电的性质,使其与抗体相吸附,从而将抗体标记。
第253题
下列关于免疫渗滤试验叙述错误的是
A.斑点金免疫渗滤试验(DIGFA)是将抗原或抗体点加在固相载体硝酸纤维素薄膜上
B.免疫渗滤试验(IFA)用于检测各种传染病的抗体和肿瘤标志物等。
C.斑点金免疫渗滤试验(DIGFA)简化了操作步骤,成为床边检验(POCT)的主要方法之一
D.斑点金免疫渗滤试验(DIGFA)抗原抗体反应后,形成大分子胶体金复合物,从而使阳性结果在膜上呈现红色斑点
E.斑点金免疫渗滤试验(DIGFA)除试验盒本身外,还需要一些仪器设备辅助
参考答案:E
解析:
斑点金免疫渗滤试验(DIGFA)是将抗原或抗体点加在固相载体硝酸纤维素薄膜上,制成抗原或抗体包被的微孔滤膜并贴置于吸水材料上,依次在膜上滴加标本、免疫胶体金及洗涤液等试剂并与硝酸纤维素膜上的相应抗体或抗原发生反应,过量试剂很快渗入吸水材料中。抗原抗体反应后,形成大分子胶体金复合物,从而使阳性结果在膜上呈现红色斑点。液体通过微孔滤膜时,渗滤液中的抗原或抗体与膜上的抗体或抗原相接触,起到亲和层析的浓缩,达到快速检测的目的,同时洗涤液的渗入在短时间内即可达到彻底洗涤的目的,简化了操作步骤,成为床边检验(POCT)的主要方法之一。本方法除试验盒本身外,不需要任何仪器设备。
第254题
关于免疫印迹法下列错误的是
A.免疫印迹法(IBT)亦称酶联免疫电转移印迹法
B.IBT是在蛋白质电泳分离和抗原抗体检测的基础上发展起来的一项检测蛋白质的技术
C.它将SDS-聚丙烯酞胺凝胶电泳的高分辨力与抗原抗体反应的高特异性相结合
D.第一阶段为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
E.第三阶段为电转移。此阶段分离的蛋白质条带肉眼可见
参考答案:E
解析:
第一阶段为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SD孓PAGE)。抗原等蛋白样品经SDS处理后带负电荷,在聚丙烯酰胺凝胶中从阴极向阳极泳动,分子量越小,泳动速度就越快。此阶段分离效果肉眼不可见(只有在染色后才显出电泳区带)。第二阶段为电转移。此阶段分离的蛋白质条带肉眼仍不可见。第三阶段为酶免疫定位。将印有蛋白质条带的硝酸纤维素膜(相当于包被了抗原的固相载体)依次与特异性抗体和酶标第二抗体作用后,加入能形成不溶性显色物的酶反应底物,使区带染色。
第255题
固相膜免疫测定中最为常用的固相膜是
A.玻璃纤维素(fiberglass)膜
B.尼龙(nylon)膜
C.聚偏氟乙烯(PVDF)膜
D.硝酸纤维素(NC)膜
E.以上都不是
参考答案:D
解析:
固相膜免疫测定中常用的膜为玻璃纤维素(fiberglass)膜、尼龙(nylon)膜、聚偏氟乙烯(PVDF)膜和硝酸纤维素(NC)膜等。其中最常用为NC膜。
第256题
关于标本处理下列错误的是
A.悬浮培养的细胞经离心沉淀后做细胞涂片
B.各种体液、穿刺液标本量少,可直接涂片或经离心后取沉淀物涂片
C.各种实验动物和人体活检组织
D.标本的固定应以不损伤细胞形态,不干扰固定后抗原的识别和结合为原则
E.为了使抗原达到最大限度的保存,首选的制片方法是石蜡切片
参考答案:E
解析:
冷冻和石蜡切片是免疫组化最常用的制片方法。为了使抗原达到最大限度的保存,首选的制片方法是冷冻切片。其操作简便,可避免石蜡切片因固定、脱水、浸蜡等对抗原所造成的损失,适用于不稳定的抗原。石蜡切片是研究形态学的主要制片方法,它不但是观察组织细胞结构的理想方法,而且可用在陈旧石蜡包埋材料免疫组化的回顾性研究。切片薄而有连续性,可长期保存。但对抗原的保存不如冷冻切片。
第257题
以下哪一项不是激光共聚焦显微镜(LSCM)的特点
A.可对细胞内部的光学断层扫描成像
B.具备普通光学显微镜和荧光显微镜的功能
C.对样品进行立体、动态观察
D.不能观察活细胞
E.没有光的散射
参考答案:E
解析:
激光共聚焦显微镜有光的散射,造成非特异的荧光,需要用空白对照来消除本底的干扰。
第258题
免疫组化技术的优点不包括
A.形态学的直观性
B.高敏感性
C.高特异性
D.精确定量分析
E.能对抗原表达情况进行分析
参考答案:D
解析:
免疫组化技术重要的特点是形态学的直观性,用于抗原表达的定性分析,不能精确定量。
第259题
关于免疫组织化学技术错误的是
A.是指用标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应
B.免疫组织化学技术又称免疫细胞化学技术
C.免疫组织化学技术属于放射免疫沉淀试验
D.免疫组织化学技术对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项免疫检测方法
E.它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性和分子生物学技术的敏感性等巧妙地结合在一起
参考答案:C
解析:
免疫组织化学(简称免疫组化)技术中根据标志物的不同,可分为免疫荧光组织化学技术、酶免疫组织化学技术、免疫金(银)组织化学技术、亲和免疫细胞化学技术、免疫电子显微镜技术等。
第260题
下列关于T细胞亚群的分离,说法错误的是
A.原理是根据相应细胞的不同标志加以选择性纯化
B.选择去除不需要的细胞群,仅留下所需要的细胞为阴性选择法
C.凡根据细胞的表面标志进行纯化得到所需要的细胞群是阳性选择法
D.E花环沉降法是最先进的细胞分选技术
E.尼龙毛柱分离法是常用的分离方法
参考答案:D
解析:
分离淋巴细胞亚群,应根据相应细胞的特性和不同的标志加以选择性纯化。根据细胞的特性和标志选择纯化所需细胞的方法是阳性选择法,而选择性去除不要的细胞,仅留下所需的细胞为阴性选择。常用的方法包括:①E花环沉降法;②亲和板结合分离法;③尼龙毛柱分离法;④磁性微球分离法及荧光激活细胞分离仪分离法。