第201题

用于标记抗体的荧光素应符合下列要求，除外

A.与蛋白质分子形成离子键

B.荧光效率高，与蛋白结合后仍能保持较高的荧光效率

C.标记方法简单，安全无毒

D.与蛋白质结合后不影响蛋白质原有的生化与免疫学性质

E.荧光色泽与背景组织色泽对比鲜明

参考答案：A

解析：

作为标记的荧光素应符合以下要求：①应具有能与蛋白质分子形成共价键的化学基团，与蛋白质结合后不易解离，而未结合的色素及其降解产物易于清除；②荧光效率高，与蛋白质结合后，仍能保持较高的荧光效率；③荧光色泽与背景组织的色泽对比鲜明；④与蛋白质结合后不影响蛋白质原有的生化与免疫性质；⑤标记方法简单、安全无毒；⑥与蛋白质的结合物稳定，易于保存。

第202题

目前公认的最有效的检测抗核抗体的方法

A.放射免疫技术

B.ELISA

C.直接荧光法

D.间接荧光法

E.补体法

参考答案：D

解析：

由于抗核抗体(ANA)的复杂性及多样性，故测定方法繁多。目前ANA常用的方法有免疫荧光法、放射免疫法、ELISA、免疫双扩散、对流免疫电泳及免疫印迹技术等。常用间接免疫荧光法(indirectim munofluorescence，IIF)作为总的ANA筛选试验。

第203题

纯化荧光素标记抗体时，去除游离荧光素可采用的方法是

A.盐析法

B.亲和层析

C.离子交换层析

D.透析法

E.活性炭吸附

参考答案：D

解析：

抗体标记完成后，还应对标记抗体作进一步纯化，以去除未结合的游离的荧光素，纯化方法可采用透析法或层析分离法。

第204题

荧光免疫技术中，间接法所使用的第二抗体可以是

A.抗种属特异性IgA荧光抗体

B.抗种属特异性IgM荧光抗体

C.抗种属特异性IgG荧光抗体

D.以上都正确

E.以上都不正

参考答案：D

解析：

间接法中所使用的第二抗体是针对第一抗体的抗抗体，可以是抗种属特异性IgA、IgG、IgM抗体。

第205题

下述间接法描述不确切的是

A.第一抗体为针对抗原的特异性抗体

B.可用于检测抗原，也可用于检测抗体

C.第二抗体为荧光标记抗体，是针对第一抗体的抗抗体

D.操作简便，特异性高

E.可以用于多种抗体的检测

参考答案：D

解析：

直接免疫荧光法具有操作简单、时程短、特异性高的优点。

第206题

下列不符合荧光素标记免疫技术直接法的描述是

A.荧光抗体直接加于标本上

B.常用于抗核抗体的检测

C.灵敏度偏低

D.每检查一种抗原需制备特异的荧光素标记抗体

E.特异性高，非特异荧光染色因素少

参考答案：B

解析：

荧光免疫技术直接法检查抗原时，是用已知特异性抗体与荧光素结合，制成荧光特异性抗体，直接与细胞或组织中相应抗原结合，在荧光显微镜下即可见抗原存在部位呈现特异性荧光。一种荧光素标记抗体只能检查一种抗原，敏感性较差。

第207题

下列有关间接荧光法的叙述错误的是

A.敏感性高于直接荧光法

B.以荧光素标记针对抗原的特异性抗原

C.荧光素标记抗体是抗抗体

D.既可检测抗原，也可检测抗体

E.一种标记物可对多种抗原进行检测

参考答案：B

解析：

间接荧光法可用于检测抗原和抗体。本法有两种抗体相继作用，第一抗体为针对抗原的特异抗体，第二抗体（荧光素标记抗体）为针对第一抗体的抗抗体。本法灵敏度高，而且在不同抗原的检测中只需应用一种荧光素标记抗体。

第208题

下列组成荧光显微镜的结构中，与普通光学显微镜相同的是

A.聚光器

B.滤板

C.光源

D.目镜

E.物镜

参考答案：D

解析：

组成荧光显微镜的结构中，只有目镜与普通光学显微镜相同。

第209题

实验本身即可避免内源性非特异性荧光干扰的检测方法为

A.时间分辨荧光免疫测定

B.荧光酶免疫测定

C.荧光偏振免疫测定

D.直接荧光抗体染色法

E.间接荧光抗体染色法

参考答案：A

解析：

时间分辨荧光免疫测定利用荧光寿命较长的镧系元素（如Eu），延长荧光测量时间，待寿命短的自然本底荧光完全衰退后再行测定，从而有效地消除非特异性荧光。

第210题

下列哪项方法不属于免疫荧光细胞化学

A.夹心法

B.直接法

C.间接法

D.补体法

E.捕获法

参考答案：E

解析：

用免疫荧光技术显示和检查细胞或组织内抗原或半抗原物质等方法称为免疫荧光细胞（或组织）化学技术。免疫荧光细胞化学分直接法、夹心法、间接法和补体法。

第211题

下列何种方法的灵敏度最高

A.分光光度法

B.磷光法

C.荧光法

D.比浊法

E.化学发光法

参考答案：E

解析：

化学发光法是将发光系统与免疫反应相结合，以检测抗原或抗体的方法，它既具有免疫反应的特异性，更兼具有发光反应的高敏感性。

第212题

为了保证免疫荧光细胞化学染色的准确性，排除某些非特异性染色，必须在初次实验时进行对照试验。下列选项中不必要的

A.替代对照

B.阴性对照

C.吸收试验

D.阳性对照

E.补体对照

参考答案：E

解析：

为了保证免疫荧光细胞化学染色的准确性，排除某些非特异性染色，在实验中通常针对第一抗体设立对照，包括阳性对照、阴性对照、替代对照和吸收试验等。

第213题

酶联免疫吸附试验（ELISA）中应用最多的底物是

A.邻苯二胺（OPD）

B.四甲基联苯胺（TMB）

C.对硝基苯磷酸酯

D.ABTS

E.以上都不是

参考答案：B

解析：

TMB具有稳定性好，成色无需避光，无致突变作用等优点，已成为目前ELISA中应用最广泛的底物。

第214题

下列对血清中酶活力的测定的描述哪一项是错误的

A.可测定产物生成量

B.可测定底物消耗量

C.需最适温度

D.需最适pH

E.与底物浓度无关

参考答案：E

解析：

酶促反应中需要最适pH、温度及过量的底物，反应速度可用一定时间内产物生成量或底物消耗量来反映。

第215题 酶免疫技术中酶的要求

A.易与抗体或抗原偶联，标记后酶活性保持稳定

B.酶的活性要强，催化反应的转化率高，纯度高

C.作用专一性强，酶活性不受样品中其他成分的影响

D.酶催化底物后产生的产物易于判断或测量，方法简单易行、敏感和重复性好

E.以上都是

参考答案：E

解析：1.酶的活性要强，催化反应的转化率高，纯度高。
2.易与抗体或抗原偶联，标记后酶活性保持稳定，且不影响标记抗原与抗体的免疫反应性。
3.作用专一性强，酶活性不受样品中其他成分的影响，受检组织或体液中不存在与标记酶相同的内源性酶或抑制物。用于均相酶免疫测定的酶还要求当抗体与酶标抗原结合后，酶活性可出现抑制或激活。
4.酶催化底物后产生的产物易于判断或测量，方法简单易行、敏感和重复性好。

第216题

辣根过氧化物酶的酶活性基团为

A.糖蛋白

B.亚铁血红素

C.醛基

D.活跃糖基

E.羟基

参考答案：B

解析：

辣根过氧化物酶由糖蛋白和亚铁血红素组成，其酶活性基团为亚铁血红素。

第217题

下列说法错误的是

A.AP系统的敏感性一般高于应用HRP系统

B.一般采用四甲基联苯胺作为AP的底物

C.TMB是ELISA中应用最广泛的底物

D.AP较难得到高纯度制剂，稳定性较HRP低，价格较HRP高，制备酶结合物时得率也较HRP低

E.β－半乳糖苷酸的底物常用4-甲基酮基-R-D半乳糖苷

参考答案：B

解析：

邻苯二胺为在ELISA中应用最多的底物。一般采用对硝基苯磷酸酯作为碱性磷酸酶（AP）的底物。在ELISA中应用AP系统，其敏感性一般高于应用HRP系统，空白值也较低。但AP较难得到高纯度制剂，稳定性较HRP低，价格较HRP高，制备酶结合物时得率也较HRP低。在ELISA中，β-半乳糖苷酸的底物常用4-甲基酮基-R-D半乳糖苷。

第218题

HRP与底物TMB反应后的测定波长为

A.278nm

B.450nm

C.495nm

D.403nm

E.492nm

参考答案：B

解析：

TMB是一种优于OPD的新型HRP色原底物。TMB经HRP作用后变为蓝色，加入硫酸终止反应后变为黄色，最大吸收峰波长为450nm。

第219题

HRP与TMB反应后，加H2SO4终止反应前呈

A.蓝色

B.棕黄色

C.橙黄色

D.黄色

E.紫色

参考答案：A

解析：

TMB是一种优于OPD的新型HRP色原底物。TMB经HRP作用后变为蓝色，加入硫酸终止反应后变为黄色，最大吸收峰波长为450nm。 

第220题

选择ELISA的标记用酶，下面哪一项特性是不需要的

A.标记抗原后，酶活性保持稳定

B.具有可与抗原、抗体结合的基团

C.当酶标抗原与抗体结合后酶活性可出现激活或抑制

D.酶催化底物反应后生成的信号易于测定、重复性好

E.酶的稳定性、可溶性好

参考答案：C

解析：

选择ELISA的标记用酶，保证标记抗原后，酶活性保持稳定。